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teknova培養(yǎng)基在優(yōu)化過程中的設(shè)計步驟

2022-06-14      1034
  培養(yǎng)基是指人工模擬細胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì),是提供細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。
  teknova培養(yǎng)基的澄清度應(yīng)以便于輕松的觀察到渾濁為宜、濃度應(yīng)當(dāng)遵循供應(yīng)商建議的濃度、若無菌生產(chǎn)過程中使用了過濾器,能夠通過生產(chǎn)過程同一級別的過濾器過濾為準(zhǔn),如需稀釋過濾,培養(yǎng)基濃度應(yīng)提供微生物生長能力驗證;同時培養(yǎng)基料液應(yīng)能滿足全部覆蓋生產(chǎn)設(shè)備。影響該培養(yǎng)基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時間外,還有培養(yǎng)基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數(shù)量、微生物細胞含水量、微生物細胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。
  teknova培養(yǎng)基的優(yōu)化過程中,實驗設(shè)計分為3個步驟:
  1.篩選,基于現(xiàn)有商業(yè)培養(yǎng)基進行篩選,以確定重要組分的群組以及初步優(yōu)化,如使用簡單的、以實驗為依據(jù)的單次單因子方法解決復(fù)雜的優(yōu)化。
  2.優(yōu)化,基于DOE對已確定的重要組分進行進一步優(yōu)化,主要優(yōu)化基礎(chǔ)培養(yǎng)基、補料培養(yǎng)基、一些添加物等,如使用響應(yīng)曲面法找出多變量體系中的*條件。
  3.驗證,對最終的培養(yǎng)基進行放大驗證,分別用優(yōu)化好的培養(yǎng)基與現(xiàn)用的或商業(yè)無血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,比較各自的生長指標(biāo)與抗體表達水平。
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